
案例說(shuō)明
炙淫羊藿(淫羊藿)配方顆粒試樣經(jīng)25%乙醇溶液超聲提取后,采用梯度洗脫,用紫外檢測(cè)器測(cè)定。炙淫羊藿(淫羊藿)配方顆粒應(yīng)呈現(xiàn)8個(gè)特征峰。
分析條件
色譜柱:Kromasil 100-5-C18,4.6x250mm (訂貨號(hào):M05CLA25)
流動(dòng)相:(A)乙腈 (B)0.1%甲酸溶液
按下表進(jìn)行梯度洗脫:
時(shí)間/min  | 流動(dòng)相A(%)  | 流動(dòng)相B(%)  | 
0  | 15  | 85  | 
25  | 25  | 75  | 
38  | 25  | 75  | 
50  | 40  | 60  | 
55  | 40  | 60  | 
65  | 65  | 35  | 
66  | 15  | 85  | 
70  | 15  | 85  | 
流速:1.0mL/min
進(jìn)樣量:10μL
柱溫:30℃
波長(zhǎng):270nm
分析圖譜
根據(jù)上述色譜條件, 分別將參照物溶液與供試品溶液注入液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定。參照物溶液的色譜圖如圖1所示,色譜圖積分結(jié)果見(jiàn)表1。

 
表1參照物溶液色譜圖積分結(jié)果
目標(biāo)物  | 保留時(shí)間  | 峰面積  | 峰高  | 理論塔板數(shù)  | 分離度  | 對(duì)稱/拖尾因子  | 
朝藿定C  | 42.050  | 3027.357  | 112.524  | 56376  | -  | 0.96  | 
淫羊藿苷  | 44.433  | 11222.050  | 750.508  | 208317  | 4.34  | 0.88  | 
寶藿苷Ⅰ  | 63.000  | 1248.856  | 173.548  | 1873426  | 64.76  | 1.00  | 
由表1中數(shù)據(jù)可知,淫羊藿苷的理論塔板數(shù)為208317,滿足《炙淫羊藿(淫羊藿)配方顆粒》中規(guī)定的不應(yīng)低于 1500的要求。
供試品溶液的色譜圖如圖2所示,色譜圖積分結(jié)果見(jiàn)表 2

 
表2 供試品溶液色譜圖積分結(jié)果表
目標(biāo)物  | 保留時(shí)間  | 峰面積  | 峰高  | 理論塔板數(shù)  | 分離度  | 對(duì)稱/拖尾因子  | 
1:朝藿定A  | 37.275  | 806.789  | 36.726  | 68232  | -  | 1.00  | 
2:朝藿定B  | 39.508  | 3745.575  | 156.529  | 62959  | 3.72  | 0.96  | 
3:朝藿定C  | 42.250  | 1390.918  | 51.660  | 55528  | 4.07  | 0.93  | 
4  | 43.717  | 697.871  | 41.937  | 152695  | 2.52  | 0.97  | 
5(S):淫羊藿苷  | 44.542  | 5282.503  | 365.718  | 219949  | 1.99  | 0.91  | 
6  | 59.975  | 374.647  | 39.924  | 948089  | 49.30  | 0.99  | 
7  | 60.292  | 124.188  | 14.643  | 1152329  | 1.34  | 0.79  | 
8:寶藿苷Ⅰ  | 63.033  | 248.137  | 35.338  | 1901644  | 13.46  | 1.02  | 
由圖2和表2中數(shù)據(jù)可知,供試品溶液色譜圖中呈現(xiàn) 8個(gè)特征峰,其中峰3、峰5和峰8分別與相應(yīng)對(duì)照品朝藿定C峰、淫羊藿苷峰和寶藿苷I峰的保留時(shí)間相對(duì)應(yīng)。按中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)計(jì)算,供試品特征圖譜與對(duì)照特征圖譜經(jīng)Mark峰相似度計(jì)算,相似度為0.959,滿足《炙淫羊藿(淫羊藿)配方顆?!分邢嗨贫炔坏玫陀?0.90的要求。
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